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基础科研服务|ag尊龙凯时小鼠光老化模型实验技术

来源:裘荷贤 日期:2025-03-01

皮肤光老化的定义

ag尊龙凯时指出,皮肤光老化(Skin photoaging)是指皮肤因长期暴露于紫外线辐射而产生的衰老相关病变,主要发生在面部、颈部、前臂及上胸部等经常暴露在阳光下的区域。光老化的典型特征包括皮肤粗糙、干燥、松弛,皱纹增多以及弹性降低,色素异常表现为黑色或褐色斑点,毛细血管扩张,严重时可能导致各种良性或恶性皮肤肿瘤的发生。

基础科研服务|ag尊龙凯时小鼠光老化模型实验技术

光老化的发生机制

光老化的机制主要与紫外线损伤、胶原蛋白及弹性纤维的改变、氧化应激及细胞信号通路的影响等因素有关。这些因素共同导致皮肤在外观及质地上发生明显的损害,包括皱纹、松弛、粗糙和色素沉着等表现。

动物模型的构建

1. 实验动物

使用10-12周龄的SPF级ICR小鼠,适应性饲养1周以便于适应实验环境。采用电动剃须刀剃除各组小鼠背部约3cm*5cm的毛发。

2. 实验设备

采用311nm的UVB紫外灯管,安装在自制的紫外照射箱中,紫外灯距离小鼠背部约为20cm。

3. 实验流程

每日定时将9W的UVB紫外线灯管固定于模型组小鼠背部暴露区域上方20cm处,照射2小时,UVB的日照射剂量约为135J/cm²,持续造模时间为八周,每隔一天进行紫外照射。

4. 光老化模型鉴定

隔日观察ICR小鼠的一般状态,包括食量和精神状态,并对小鼠背部皮肤的光老化相关宏观特征(如皱纹、增厚、粗糙、弹性和红斑等)进行评价,记录背部皮肤的变化,并根据光老化评分标准进行宏观评分。

皮肤组织学检测

1. HE检测

在经过HE染色后,光学显微镜观察皮肤组织的角质层、表皮层和真皮层的结构及细胞层数,以及毛囊、汗腺和皮脂腺等附属器官的形态,观察小鼠是否存在出血现象及炎性细胞浸润等。

2. Masson检测

通过Masson染色后的皮肤组织在光学显微镜下观察,可以显示胶原纤维的分布及形态,蓝色代表胶原纤维,而细胞质、肌纤维和红细胞则呈现红色,细胞核呈蓝褐色。这一检测可以帮助观察胶原纤维的含量及其形态和分布的变化情况。

实验总结

通过使用311nm的UVB紫外线灯进行8周照射,我们成功构建了小鼠皮肤光老化模型。模型组小鼠的皮肤出现明显的红润、松弛、粗糙、色素沉着和皱纹增加等变化。病理观察显示表皮增厚,胶原纤维含量减少且排列紊乱等现象,进一步证实了皮肤光老化的特征。

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